将雌性C57BL/6小(xiǎo)鼠束縛，将其後腿置于加熱輛錢箔上5分(fēn)鐘(40°C)以促進氧文線氣通過皮膚擴散。Clark 型電(dià分媽n)極(Ox-100，Unisense，丹麥)使用前在37°C的脫氧(使用N件可a2S2O5)或空氣飽和水中(zhōng)進行了兩放志點校準。将銳化的微電(diàn)極（直徑100μm）推進到腳墊的加熱皮膚中輛票(zhōng)。使用微操作器以标準化方式進行算請測量。每秒記錄兩次測量值，并使用 Sensor Tra道行ce PRO 3.1.3 軟件評估數據。

使用熒光比率成像(FRIM)或基于熒光壽命成像(FLI刀問M)的光學讀出進行的測量如下(xià)：将每隻小(xiǎo)鼠的腳固定在自畫服粘式加熱箔上(圖1A)。先在腳上滴一(yī)滴水，然後在腳上覆要飛蓋一(yī)層發光的氧傳感器薄膜。鋁箔與皮膚緊密接觸，确保傳感器和腳部之間風車不存在會導緻錯誤測量的氣泡。使用透明膠帶拿跳将傳感器額外(wài)在小(xiǎo)鼠腳問地的頂部（圖 1B）。沒有對腳施加過大(dà)的壓年我力。在平衡時間5分(fēn)鐘後開(kāi)始測量。F窗西LIM使用CCD相機、可脈沖460 nm LED和濾光地錯片組成的系統進行。用氣體(tǐ)混合裝置産生(shēng)的不同的pO2明們值對傳感器箔片進行預校準。使用軟件（Imag件文e X TG1 v 4.0）對數據進行分(fēn)析。VisiSens道算™傳感器箔(SF-RPSu4，Presens)在使用前使用Na2S2O唱多5進行了校準。使用安裝在三腳架上的VisiS雜年ens™探測器單元DU01原型（FRIM設備）在黑暗的環兵務境中(zhōng)記錄信号。使用VisiSens™ AnalytiCal 1嗎車軟件對數據進行分(fēn)析。

圖2顯示了使用銳化的 Clark型微電(diàn)極的測量結果，該化紙微電(diàn)極是使用顯微操作器通過小(xiǎo)鼠皮膚推進的。微電(dià北資n)極尖端施加的壓力會導緻皮膚組織在穿透皮膚之前發生(shē房地ng)局部缺血。穿透後，局部壓力和壓力引起的局部缺血立即解除，導緻記錄近討的血氧飽和度增加。微電(diàn)極在組織中(zhōng)不再進一(一機yī)步推進，并在大(dà)約10秒内記錄皮膚氧飽快白和度。最後，将微電(diàn)極從組織中(zhōng她知)取出。總之，使用Clark型電(diàn身工)極的實驗表明，小(xiǎo)鼠的平均皮膚氧飽和度為4.8%±1.8%(平均草爸±标準差，n=7)。

使用基于FLIM的成像技術進行了快速壽命成像測量，術就結果如圖3所示。表明平均皮膚氧飽和度為5.5%±0.9%(平均±标準差，n=1媽畫4；圖3B)。

VisiSens™氧氣成像系統的比率測量為數結果如圖4所示。表明平均皮膚氧飽和度為5.4%±0.8%(平均值±标準差也習，n=16；圖4B)。

我(wǒ)(wǒ)們已經驗證了VisiSens氧氣成像系統對 Clark型弟弟微電(diàn)極和基于FLIM的光學氧氣成像系統的有效老樹性，以确定小(xiǎo)鼠的皮膚氧飽和度。我(wǒ著自)(wǒ)們的數據表明，使用VisiSe照內ns或基于FLIM的光學氧氣成像系統進行皮膚氧分(fēn)壓的經皮成像與使用關事經典Clark型微電(diàn)極進行侵入性測量提供相同的氧氣濃度。與Clar用也k型微電(diàn)極相比，使用VisiSe亮黃ns系統進行的氧氣測量很容易進行。此外(wài)，光學傳感器可以科東對大(dà)面積皮膚的皮膚組織氧合進行非放知侵入性量化。因此，基于FRIM的光學氧氣成像系統VisiSens是分(fēn)歌河析皮膚組織氧合的完美工(gōng)具。綜上所述，這項技術将促進我(wǒ)(相在wǒ)們對組織氧合的局部調節及其對癌症、傳染病和心血管疾病發病機音區制的影響的理解。